近十年来，PCR技术（多聚酶链式反应)成为分子生物学实验室里的一种常规手段，其原理是利用DNA半保留复制，在试管中进行DNA的人工复制（如下图所示)，在很短的时间内，将DNA扩增几百万倍甚至几十亿倍，使实验室所需要的遗传物质不再受限于活的生物体。

（1)加热使DNA双链打开，这一步是打开___\_键，称为___\_，细胞中氢键是在_____的作用下断裂的。 （2)当温度降低时，引物与模板末端结合，在DNA聚合酶的作用下，引物沿模板延伸，最终合成2条DNA分子，此过程中原料是____\_，遵循的原则是__________。 （3)PCR技术的必要条件，除了模板、原料、ATP、酶以外，至少还需要三个条件，即：液体环境、适宜的____\_和_______。 （4)通过PCR技术使DNA分子大量复制，若将一个用15N标记的DNA分子放入试管中，以14N标记的脱氧核苷酸为原料，连续复制四次后，则15N标记的DNA分子占全部DNA总数的比例为_______。

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• 聚合酶链式反应（PCR)是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。PCR过程一般经历下述30多次循环：95℃下使模板DNA变性、解链→55℃下复性（引物与DNA模板链结合)→72℃下引物链延伸（形成新的脱氧核苷酸链)。下列有关PCR过程的叙述中不正确的是

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  A．变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键，也可利用解旋酶实现B．复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成C．延伸过程中需要DNA聚合酶、ATP、四种核糖核苷酸D．PCR与细胞内DNA复制相比所需酶的最适温度较高

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• 关于PCR技术的说法不正确的是

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  A．PCR是体外复制DNA的技术B．PCR技术获取目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列C．PCR过程中只需要两种引物分子D．PCR依据的是DNA双链复制原理

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• 请回答下列关于微生物的问题：
  （1)“闻着臭，吃着香”的臭豆腐驰名中外，其制作过程中所用的微生物主要是_____\_。在制作过程中，加盐的作用是________\_。臭豆腐表面往往有一层致密的皮，这层皮实际上是微生物的________，它对人体是无害的。
  （2)欲从土壤中分离高效降解有机磷农药的细菌，可在培养基中加入有机磷农药制成___\_培养基进行分离；若想对初步筛选得到的目的菌进行纯化并计数，可采用的接种方法是_________。
  （3)Taq细菌1966年被发现于美国黄石国家公园，它的发现促成了PCR技术的自动化，这是因为它为PCR技术提供了___\__。PCR技术是DNA循环复制的过程，每次循环可以分为__________三步。
  （4)微生物培养过程中，除考虑菌体生长的条件（_____\_)外，还要防止外来杂菌的入侵，所以要灭菌，其中对培养皿进行灭菌常用的方法是_________\_，对培养基则用_________。

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• 聚合酶链式反应（PCR技术)是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法，由高温变性、低温退火及适温延伸等几步反应组成一个周期，循环进行，使目的DNA得以迅速扩增，其简要过程如下图所示。下列关于PCR技术叙述不正确的是

  

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  A．PCR技术是在实验室中以少量DNA制备大量DNA的技术B．反应中新合成的DNA又可以作为下一轮反应的模板C．PCR技术中以核糖核苷酸为原料，以指数方式扩增D．应用PCR技术与探针杂交技术可以检测基因突变

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• 在基因工程中，把选出的目的基因（共1000个脱氧核苷酸对，其中腺嘌呤脱氧核苷酸460个)，放入DNA扩增仪中扩增4代，那么，在扩增仪中应放入胞嘧啶脱氧核苷酸的个数是

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  A．540个B．7560个C．8100个D．17280个

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