还原态的NADH是一种具有荧光的辅酶。在λex=340nm;λem=465nm条件下,测得荧光强度如下表所示,求算未知液中辅酶的物质的量浓度。
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对于一个在激发过程中吸收4.9×1017个光子,而在产生荧光过程中发射出2.9×1017个光子的特定反应,计算其量子效率。
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常规的荧光分析法中,间接测量法不包括下面中的那个()。
A、荧光衍生法
B、荧光猝灭法
C、荧光吸收法
D、敏化荧光法
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下面是荧光分析法定量检测维生素B2的试验步骤,其中有3处错误,请指出来并解释原因。 1、系列标准溶液的制备 取维生素B2标准溶液(10.0μg/mL) 0.50mL、1.00mL、1.50mL、2.00mL、2.50mL分别置于25mL的容量瓶中,各加入去离子水稀释至刻度,摇匀。得浓度依次为0.20μg/mL、0.40μg/mL、0.60μg/mL、0.80μg/mL、1.00μg/mL的一系列维生素B2标准溶液。待测。 2、激发光谱和荧光发射光谱的绘制 设置λem=540nm为发射波长,在500~1000nm范围内扫描,记录荧光发射强度和激发波长的关系曲线,便得到激发光谱。从激发光谱图上可找出其最大激发波长λex。 从得到的激发光谱中找出最大激发波长,在此激发波长下,在250-500nm范围内扫描,记录发射强度与发射波长间的函数关系,便得到荧光发射光谱。从荧光发射光谱上找出其最大荧光发射波长λem。 3、标准溶液及样品的荧光测定 固定任意一个激发波长和荧光发射波长。测量上述系列标准维生素B2溶液的荧光发射强度。数据记录于表中。以溶液的荧光发射强度为纵坐标,标准溶液浓度为横坐标,制作标准曲线。 在同样条件下测定未知溶液的荧光强度,并由标准曲线确定未知试样中维生素B2的浓度,计算待测样品溶液中的维生素B2的含量。